自动斑马鱼成像系统助力卡波西样淋巴瘤筛选130多种潜在疗法

卡波西样淋巴管瘤（KLA）是一种系统性淋巴管发育异常疾病，具有侵袭性生长、多灶性累及及预后不良的特点，且90%的病例存在NRAS基因Q61R突变。斑马鱼因其胚胎透明、繁殖快、基因编辑便捷等特性，成为构建KLA模型的理想选择：

• 基因编辑技术：通过CRISPR/Cas9等技术在斑马鱼中引入NRAS突变，可模拟KLA的病理特征（如淋巴管异常增生和梭形细胞簇形成.

• 活体成像：斑马鱼胚胎透明，可直接观察淋巴管发育动态及药物干预后的表型变化，如血管形态、血流动力学等。

自动成像系统的关键技术

（1）高通量筛选平台

• hemes自动化筛选系统：可对1-7天龄斑马鱼幼虫进行全自动、多角度成像，避免手动摆位误差，显著提升实验效率。

• 高内涵成像系统：支持Z堆叠拍摄和多通道荧光成像，捕捉淋巴管异常的三维结构，并结合AI算法自动分析表型数据（如血管密度、细胞迁移等）。

（2）动态监测与功能验证

• 激光散斑血流成像：实时监测药物对斑马鱼血流的影响，评估血管生成抑制剂等候选药物的效果。

• 单细胞分辨率技术：结合斑马鱼模型构建泛癌种脉管系统图谱，揭示KLA相关淋巴管生成的分子机制，指导靶向药物开发。

在KLA药物筛选中的具体应用

（1）候选药物初筛

• 高通量化合物库测试：利用斑马鱼模型快速筛选130多种化合物，通过自动化成像系统评估其对淋巴管异常增生的抑制作用，并结合表型指标（如胚胎存活率、血管密度）进行初步筛选。

• 天然药物成分筛选：斑马鱼模型尤其适用于中药微量成分的快速评价，为KLA的替代疗法提供新途径。

（2）靶向机制验证

• 多组学联合分析：通过MS-ZTV平台整合基因组学、转录组学与斑马鱼表型数据，验证候选药物对NRAS信号通路的调控作用。

• 荧光标记与3D重构：例如，利用转基因斑马鱼标记淋巴管内皮细胞（如Tg(Fli1:eGFP)），结合高分辨率成像观察药物对淋巴管结构的修复效果。

（3）疗效与安全性评估

• 动态毒性监测：通过活体成像实时追踪药物对斑马鱼心脏、肝脏等器官的毒性反应，优化剂量与给药方案。

• 免疫治疗探索：参考CAR-T技术在淋巴瘤中的成功案例，开发针对KLA的靶向免疫疗法（如抗淋巴管内皮标志物的CAR-T细胞），并在斑马鱼模型中验证其特异性与安全性。

Hemes自动化筛选系统优势

• 模型优化：现有斑马鱼模型难以完全模拟KLA的多器官累及特性，需结合基因编辑与组织特异性诱导技术改进。

• 数据分析自动化：开发更高效的AI算法，实现复杂表型（如梭形细胞簇分布）的自动识别与量化。

• 临床转化：通过多中心合作验证斑马鱼筛选结果与哺乳动物模型及临床试验的一致性，加速潜在疗法的临床应用。

自动斑马鱼成像系统通过整合高通量筛选、动态成像与多组学分析，为卡波西样淋巴瘤的疗法开发提供了高效平台。未来，随着基因编辑与AI技术的进一步融合，该系统有望在罕见病药物筛选中实现更精准的靶向干预和个性化治疗。

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